產品概述
    本產品是一種具有高效轉染、低毒性的陽離子聚合物核酸轉染試劑，適用于大多數的真核細胞，可以用于原代細胞和懸浮細胞體外轉染。本品為經過優化的納米材料，它不僅改善了轉染試劑存在細胞毒性的問題，對于大多數細胞，轉染72小時后不更換培養基無明顯毒性；同時在血清存在的條件下，也能達到高效的轉染效果。



操作步驟
（以24孔板為例，如使用其它規格培養板/皿，請參照轉染試劑建議使用劑量標準進行調整。為了獲得最佳轉染效果，請根據實驗優化使用劑量）

1. 接種細胞

貼壁細胞：轉染前一天，接種適量細胞（0.5 ~ 2×10⁵）接種至500 μl不含抗生素的培養基中，使轉染時細胞密度達到70 ~ 80%匯合度。
懸浮細胞：轉染前，接種4~ 8×10⁵個/孔于500 μl不含抗生素的培養基中。

2. 轉染復合物配制（以24孔板每孔用量為參考）

1. 取0.8 μg質粒DNA稀釋于50 μl無血清培養基中，輕輕吹吸混勻；
2. 取2 μl轉染試劑稀釋于50 μl無血清培養基中，充分混勻，室溫條件下孵育5分鐘；
3. 將a和b稀釋的質粒和轉染試劑混合，充分混勻（可渦旋振蕩），室溫條件下孵育20分鐘；

3. 轉染細胞：將孵育20分鐘后的轉染復合物以100 μl/孔加入24孔板的細胞中，輕輕搖勻。
4. 將細胞置于培養箱中培養18 ~ 48小時后檢測細胞轉染結果，此過程中可以不更換含轉染復合物的培養基（對于敏感細胞建議在4 ~ 6小時后更換培養基）。

 
儲存條件
4℃保存，1年有效；-20℃保存，2年以上有效；反復凍融不影響試劑的質量。
僅供科學研究使用

優化轉染
    為了獲得最佳的轉染效果，降低其它因素的影響，需要根據具體實驗情況，調整細胞接種密度、轉染試劑/質粒DNA劑量來優化轉染條件。敏感細胞可適當提高接種密度，確保細胞維持較高的增殖能力；轉染試劑/質粒DNA劑量比例可在1:1至1:5之間調整。
 
轉染試劑建議使用劑量
 

培養容器	細胞接種體積(ml)	DNA用量(μg)	轉染試劑用量(μl)	稀釋體積(μl)
96孔板	0.1	0.2	0.5	25
24孔板	0.5	0.8	2.0	50
12孔板	1	1.6	1.0	100
6孔板	2	4.0	10	250
6 cm板	5	8.0	20	500
10cm板	15	24	60	1500

（為了獲得最佳轉染效果，請根據實驗優化使用劑量）
 
注意事項

1. 轉染前必須確保細胞處于良好的生長狀態；
2. 為避免細胞出現死亡，培養基中盡量不要添加抗生素；
3. 使用高純度的質粒確保高效的轉染效率；
4. 使用前充分搖勻轉染試劑（或渦旋振蕩），使轉染試劑分布均勻；
5. 質粒和轉染試劑稀釋時，請使用無血清無抗生素的培養基（有條件可以使用Opti-MEM低血清培養基）；